Real Time PCR per la diagnosi di herpesvirus nelle infezioni del sistema nervoso

Introduzione. I virus erpetici risultano strettamente correlati all’insorgenza di numerose infezioni del sistema nervoso centrale, che si manifestano con segni clinici per lo più non specifici. L’utilizzo di un accurato sistema diagnostico è quindi indispensabile per un corretto monitoraggio ed approccio terapeutico di queste patologie. La RT-PCR, per la sua elevata sensibilità e specificità, risulta essere il metodo più idoneo per l’analisi del liquor. Nel nostro studio abbiamo voluto analizzare i dati ottenuti dall’associazione di un sistema automatico di estrazione del DNA alla RT-PCR per standardizzare una metodica utile per la rilevazione del genoma virale. Metodi. Sono stati analizzati 155 campioni di CSF (raccolti da Settembre 2005 a Dicembre 2006) da pazienti adulti affetti da varie patologie del SNC, afferenti ai reparti di terapia intensiva, pronto soccorso, neurologia e malattie infettive del Policlinico Umberto I di Roma. Il DNA, ottenuto attraverso un sistema di estrazione automatico, è stato analizzato quantitativamente mediante Real Time PCR tipo Taq – Man per l’identificazione di HSV-1, HSV-2, EBV, HCMV, HHV6 e VZV. Risultati. 52 CSF (33.5%) sono risultati positivi ai virus erpetici testati e di questi 4 hanno mostrato coinfezione (2 HSV- 1/VZV, 1 HSV-1/HSV-2, e 1 EBV/HSV-2). 43 CSF positivi provenivano da pazienti affetti da meningo/encefalite acuta (13 VZV, 12 HSV-1, 6 EBV, 4 HSV-2, 4 HHV6), 6 da soggetti con varie sindromi neurologiche (1 HHV6/ Guillain- Barrè, 2 HCMV/Guillain-Barrè, 1 HHV6/Sclerosi laterale amiotrofica, 1 VZV/mielite, 1 HCMV/mielite) e 3 da pazienti HIV positivi (2 EBV, 1 HHV6). Tempo di refertazione 3 ore dall’arrivo del campione clinico. Conclusioni. L’utilizzo di un sistema di amplificazione di tipo Real Time associato ad una fase di estrazione automatica ci ha permesso di ottenere una buona efficienza diagnostica, accuratezza nei risultati ed elevata rapidità di esecuzione.