IL CICLO LITICO DI EBV E LA RISPOSTA AUTOFAGICA IN CELLULE DI LINFOMA DI BURKITT Francesca Colavita, Alessandra De Leo, Fabiola Ciccosanti, Gian Maria Fimia, Elena Mattia Dip. di Scienze di Sanità Pubblica e Malattie Infettive “Sanarelli”, Univ. di Roma “Sapienza” Laboratorio di Biologia Cellulare, Istituto Nazionale per le malattie infettive IRCCS ‘L. Spallanzani’, Roma Il pathway autofagico è coinvolto in numerosi processi cellulari e rappresenta un essenziale meccanismo di difesa contro le infezioni virali. Numerosi virus per sopravvivere e propagarsi all’interno dell’ospite hanno evoluto strategie in grado di evadere e di modulare la risposta autofagica a proprio vantaggio. Il virus di Epstein Barr (EBV), un γ-herpesvirus umano responsabile della mononucleosi infettiva ed associato a differenti tipi di neoplasie di origine epiteliale e linfoide, è caratterizzato da una infezione latente e una litica produttiva. Al momento non ci sono informazioni su eventuali alterazioni del pathway autofagico durante il ciclo litico del virus. Scopo di questo lavoro è stato pertanto quello di analizzare l’espressione di proteine markers di autofagia a seguito della induzione del ciclo replicativo attivo di EBV e d’altro canto, di valutare l’effetto di inibitori e promotori di autofagia sulla espressione e sulla replicazione del virus. Sono stati utilizzati due modelli cellulari di linfoma di Burkitt, le cellule Akata e Mutu, in cui il ciclo litico di EBV può essere innescato mediante trattamento delle cellule, rispettivamente con IgG o con TGF β. I risultati ottenuti dimostrano che l’attivazione della replicazione virale in cellule B infettate dal virus in forma latente, determina a tempi brevi, un aumento della componente LC3 II e della proteina p62, indici della formazione di vescicole autofagiche. Inoltre, la presenza di inibitori di autofagia quali la Bafilomicina A1 e la Spautina-1 durante l’induzione del ciclo litico di EBV provoca una sovra-regolazione dell’espressione dei geni litici e un aumento delle particelle virali prodotte. Tali dati, indicano che il ciclo replicativo attivo di EBV è contrastato dal processo autofagico e che una inibizione di quest’ultimo, in due diversi steps del pathway degradativo, genera un aumento della espressione e della replicazione del virus. In accordo con questi risultati, cellule Akata in cui beclina-1, la proteina che innesca la risposta autofagica, è stata silenziata mediante trasfezione con lentivirus, hanno mostrato un aumento significativo dell’espressione degli antigeni virali litici rispetto alle cellule trasfettate con la sequenza “scrambled”. Sono in corso studi atti a valutare la possibilità che EBV interferisca e moduli la risposta autofagica durante il ciclo litico.
Il ciclo litico di EBV e la risposta autofagica in cellule di linfoma di Burkitt / F., Colavita; DE LEO, Alessandra; F., Ciccosanti; G. M., Fimia; Mattia, Elena. - (2013), pp. 79-79. (Intervento presentato al convegno 41° Congresso Nazionale della Società Italiana di Microbiologia tenutosi a Riccione nel 13-16 Ottobre 2013).
Il ciclo litico di EBV e la risposta autofagica in cellule di linfoma di Burkitt
DE LEO, ALESSANDRA;MATTIA, Elena
2013
Abstract
IL CICLO LITICO DI EBV E LA RISPOSTA AUTOFAGICA IN CELLULE DI LINFOMA DI BURKITT Francesca Colavita, Alessandra De Leo, Fabiola Ciccosanti, Gian Maria Fimia, Elena Mattia Dip. di Scienze di Sanità Pubblica e Malattie Infettive “Sanarelli”, Univ. di Roma “Sapienza” Laboratorio di Biologia Cellulare, Istituto Nazionale per le malattie infettive IRCCS ‘L. Spallanzani’, Roma Il pathway autofagico è coinvolto in numerosi processi cellulari e rappresenta un essenziale meccanismo di difesa contro le infezioni virali. Numerosi virus per sopravvivere e propagarsi all’interno dell’ospite hanno evoluto strategie in grado di evadere e di modulare la risposta autofagica a proprio vantaggio. Il virus di Epstein Barr (EBV), un γ-herpesvirus umano responsabile della mononucleosi infettiva ed associato a differenti tipi di neoplasie di origine epiteliale e linfoide, è caratterizzato da una infezione latente e una litica produttiva. Al momento non ci sono informazioni su eventuali alterazioni del pathway autofagico durante il ciclo litico del virus. Scopo di questo lavoro è stato pertanto quello di analizzare l’espressione di proteine markers di autofagia a seguito della induzione del ciclo replicativo attivo di EBV e d’altro canto, di valutare l’effetto di inibitori e promotori di autofagia sulla espressione e sulla replicazione del virus. Sono stati utilizzati due modelli cellulari di linfoma di Burkitt, le cellule Akata e Mutu, in cui il ciclo litico di EBV può essere innescato mediante trattamento delle cellule, rispettivamente con IgG o con TGF β. I risultati ottenuti dimostrano che l’attivazione della replicazione virale in cellule B infettate dal virus in forma latente, determina a tempi brevi, un aumento della componente LC3 II e della proteina p62, indici della formazione di vescicole autofagiche. Inoltre, la presenza di inibitori di autofagia quali la Bafilomicina A1 e la Spautina-1 durante l’induzione del ciclo litico di EBV provoca una sovra-regolazione dell’espressione dei geni litici e un aumento delle particelle virali prodotte. Tali dati, indicano che il ciclo replicativo attivo di EBV è contrastato dal processo autofagico e che una inibizione di quest’ultimo, in due diversi steps del pathway degradativo, genera un aumento della espressione e della replicazione del virus. In accordo con questi risultati, cellule Akata in cui beclina-1, la proteina che innesca la risposta autofagica, è stata silenziata mediante trasfezione con lentivirus, hanno mostrato un aumento significativo dell’espressione degli antigeni virali litici rispetto alle cellule trasfettate con la sequenza “scrambled”. Sono in corso studi atti a valutare la possibilità che EBV interferisca e moduli la risposta autofagica durante il ciclo litico.I documenti in IRIS sono protetti da copyright e tutti i diritti sono riservati, salvo diversa indicazione.
