Analisi molecolare della regione genomica di controllo della trascrizione genica del Polyomavirus umano JC in pazienti trattati con farmaci biologici: dati preliminari di uno studio longitudinale.

Scopo del lavoro. Il Polyomavirus umano JC (JCV) è un virus a DNA responsabile della leucoencefalopatia multifocale progressiva (PML), una rara malattia demielinizzante ad esito talvolta fatale. L’infezione primaria si traduce in uno stato di latenza virale descritta nel 50-90% della popolazione. La regione di controllo della trascrizione virale (TCR), nella sua variante archetipa non patogena (CY), è suddivisa in 6 box (A-B-C-D-E-F), i cui riarrangiamenti portano alla formazione di varianti virulente. Recentemente, casi di PML sono stati osservati dopo terapia con biologici. Gli scopi di questo studio sono: 1. valutare la prevalenza dell’infezione da JCV in pazienti con malattie reumatiche infiammatorie croniche (MRIC) o sclerosi multipla (SM) candidati al trattamento con biologici; 2. analizzare la sequenza genomica della TCR di JCV in campioni di urina e plasma e in cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC) per individuare eventuali riarrangiamenti. Materiali e Metodi. Dopo aver ottenuto il consenso informato, abbiamo arruolato pazienti adulti consecutivi affetti da MRIC candidati al trattamento con anti-TNF e con SM candidati al trattamento con natalizumab. I pazienti sono stati sottoposti a prelievo di sangue venoso e raccolta di campioni urinari prima dell’inizio della terapia con biologici e ogni 4 mesi nel corso del primo anno di trattamento per valutare la viremia e la viruria da JCV. La viruria e la viremia da JCV e l’analisi delle sequenze genomiche sono state valutate rispettivamente mediante PCR quantitativa e qualitativa. Risultati. Sono stati arruolati 17 pazienti con MRIC (F/M: 13/4; età mediana: 57 anni [range 38-79]; durata media di malattia: 111 mesi [DS: 84,5; I.C. 95%: 1,28]) e 21 con SM (F/M: 11/10; età mediana: 35 anni [range 19-51]; durata media di malattia: 102,29 mesi [DS 39,9; I.C. 95% 0,55]). Prima dell’inizio del trattamento, 11 pazienti (65%) con MRIC mostravano una viruria significativamente più elevata (mediana 7,35 log10 gEq/mL; range: 3,87-8,13 log10 gEq/mL) rispetto a quella osservata in 3 pazienti (14%) con SM (mediana: 4,70 log10 gEq/mL; range: 3,48-6,04 log10 gEq/mL) (p<0.05), ma non viremia. Nei campioni di urina è stata isolata solo la variante CY di JCV. Dopo 1 anno di terapia con natalizumab, dai PBMC di 2 pazienti con SM è stata isolata una sequenza della TCR di JCV con una delezione del box B e una duplicazione del box C. Conclusioni. I risultati preliminari di questo studio indicano che i pazienti affetti da MRIC sono maggiormente predisposti alla riattivazione del virus JC a livello renale, osservabile come viruria, rispetto ai pazienti con SM. Inoltre, per un’accurata stratificazione del rischio di insorgenza di PML in pazienti trattati con biologici, è importante studiare i riarrangiamenti della TCR nei PBMC, da considerarsi validi biomarcatori ematologici della virulenza di JCV.