A novel coordinated function of myosin II with GOLPH3 controls centralspindlin localization during cytokinesis in drosophila

In animal cell cytokinesis, interaction of non-muscle myosin II (NMII) with F-actin provides the dominant force for pinching the mother cell into two daughters. Here we demonstrate that celibe (cbe) is a missense allele of zipper, which encodes the Drosophila Myosin heavy chain. Mutation of cbe impairs binding of Zipper protein to the regulatory light chain Spaghetti squash (Sqh). In dividing spermatocytes from cbe males, Sqh fails to concentrate at the equatorial cortex, resulting in thin actomyosin rings that are unable to constrict. We show that cbe mutation impairs localization of the phosphatidylinositol 4-phosphate [PI(4)P]-binding protein Golgi phosphoprotein 3 (GOLPH3, also known as Sauron) and maintenance of centralspindlin at the cell equator of telophase cells. Our results further demonstrate that GOLPH3 protein associates with Sqh and directly binds the centralspindlin subunit Pavarotti. We propose that during cytokinesis, the reciprocal dependence between Myosin and PI(4)P-GOLPH3 regulates centralspindlin stabilization at the invaginating plasma membrane and contractile ring assembly.

Nella citochinesi delle cellule animali, l'interazione della miosina II non muscolare (NMII) con l'actina F fornisce la forza dominante per dividere la cellula madre in due figlie. Qui dimostriamo che celibe (cbe) è un allele missenso di zipper, che codifica per la catena pesante della miosina in Drosophila. La mutazione di cbe altera il legame della proteina Zipper con la catena leggera di spaghetti squash (Sqh). Negli spermatociti in divisione dai maschi cbe, Sqh non riesce a concentrarsi nella corteccia equatoriale, determinando anelli sottili di actomiosina che non sono in grado di restringersi. Mostriamo che la mutazione cbe altera la localizzazione di Golgi phosphoprotein 3 (GOLPH3, anche conosciuta come Sauron) che lega il fosfatidilinositolo 4-fosfato [PI (4) P] e il mantenimento della centralspindlina al cell equator durante la telofase. I nostri risultati dimostrano ulteriormente che la proteina GOLPH3 si associa a Sqh e si lega direttamente alla subunità centralspindlin Pavarotti. Proponiamo che durante la citochinesi, la dipendenza reciproca tra miosina e PI (4) P-GOLPH3 regola la stabilizzazione centralspindlin presso la membrana plasmatica invaginante e l'assemblaggio dell'anello contrattile.